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荧光显微镜使用的重要注意事项




来源:本站编辑:yiyi
时间:2011-6-19 10:32:48

荧光显微镜使用的重要注意事项

一、操作指南:
(1)一般需要关掉实验室内的电灯,开显微镜汞灯。需要延长汞灯的使用寿命,就要汞灯开启不到请在15-30分钟后再关闭汞灯。
       下一次打开汞灯电源的距离这次关闭相隔时间应该30分钟以上,较好要禁止反复开关。
(2)根据样品荧光素来挑选适合的荧光组件。利用减光片对荧光强度灵活进行调整(荧光强度是不可调,
          需要利用各种减光片来实时的调整观测效果)
(3)不同的激发光波长应该选择不同的滤光片,常有绿、蓝、紫、紫外等
(4)放置染色切片,调整好合适视野,可以先在明场下调校要观察的位置再使用荧光。一般荧光状态观测标本,
         标本荧光会很快的的衰减,所以避免较长时间的荧光下观测,
(5)在实验前确认好是否需要拍片,并且确认照相机实验前已装好节省时间。
(6)使用荧光显微镜结束后,关掉所有电源,而且需做好使用记录。


二、主要事项:

(1)严格遵循荧光显微镜使用说明书要求使用,禁止随意改变使用步骤。
(2)应该在暗室中操作。在暗室内,等待眼睛完全适应暗室,
         再开始观察标本。,开启电源,启动高压汞灯5~15分钟
(3)为避免紫外线对眼睛损害。再调校光源同时佩戴防护眼镜。
(4)观测时间每次以1~2小时较佳,超过100分钟,荧光减弱;标本受紫外线照射3~5min后,荧光也会明显衰退或褪色;
       激发光长时间的照射,会发生荧光的衰减和淬灭现象;
(5)荧光显微镜的汞灯使用时间有限,实验标本较好集中检测,延长光源使用时间。温度高时,应配备降温系统,
         新换灯泡要进行记录使用记录。
(6)观测立刻观测在标本染色后,荧光会随时间延长逐渐减弱。但是将标本放置于聚乙烯塑料袋中4℃保存,
         可延长荧光减弱速度
(7)荧光亮度标准:为四级,即“—”——无或可见微弱自发荧光。“+”——仅能见明确可见的荧光。“++”——可见有明亮的荧光。“+++”——可见耀眼的荧光。
(8)使用玻片等载体,厚度必须均匀,没有明显自发荧光,如使用油镜,保证镜油必须是无荧光镜油。
(9)装稳压器,电压的不稳定将降低汞灯的的使用时间,并影响镜检结果。

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