植物细胞样品-观察的多种方法的光学显微镜
早期使用显微镜观察的样品通常是活的，或者说至少短时间是活的。
固定和染色技术随着显微镜的进步而发展。
由于显微镜光学的改进，光学系统的局限性确定了样品制备的必要
性。显微镜研究者根据光学的局限性作出了适当的让步。放大、数值孔
径值、分变率限度、工作距离和色彩偏差纠正被认作为相关因素。
另外，各种照明方法包括亮视野、暗视野、相差和荧光相继被引人
主流显微镜。随着这些类型显微镜的利用，人们接受了这样一个事实：
即样品需要制备成能满足显微镜光学局限的要求。通常大多数这些的制
备需要固定样品。
现在已经能通过各种分子的、生化的、免疫学和显像技术直接观察
活体的已知类型分子的动力学特性。例如，广泛使用的绿色荧光蛋白
（green fluorescent protein ， GFP）标记方法就能直接观察活体细
胞的特殊结构成分。不过，为了在显微镜视野下观察活的和健康的哺乳
动物细胞，还存在一些与培养基的温度和pH等相关的技术问题。当观察
非哺乳动物细胞或植物细胞时，这不是一个重要问题。
按经典分类，活细胞实验能分成两类：确定自然行为的发育学研究
和研究调控因子效应的诱导性改变。体内体外现象之间的关系对于哺乳
动物活细胞研究极为重要。在活细胞显微镜观察期间精确地模拟分离样
品的宿主条件十分重要。
活细胞显微镜观察的多种方法。
