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图像荧光显微镜的原理,适合微生物细胞分析研究




来源:yiyi
时间:2014-6-25 18:34:02

图像荧光显微镜的原理,适合微生物细胞分析研究

荧光显微镜

    荧光显微镜可用来估算微生物群体密度和生存能力,其原理为:
某些分子能吸收特定波长的光,并释放出不同波长的光(即荧光),
能够在荧光显微镜下被观察到。

    自然界有些物质(如叶绿素)能够产生荧光,人工合成的某些物
质(如荧光团)也能产生荧光。荧光基团吸收蓝色光形成激发态,激
发态电子迅速释放出多余的能量而返回到基态。

    当电子释放能量回到基态时,释放出的绿色光能量较低,且波长
较蓝色光长。

    然而,有些荧光基团能吸收绿色光而激发出能量更低、波长更长
的红色光。


    在荧光显微技术中,特定的染色剂被细胞直接吸收,或者与细胞
中的有机物发生化学反应,或者被特定的亚细胞器富集。免疫化学技
术也经常被应用于荧光显微技术,

    因为荧光染料可以与活细胞膜中某些部位发生特异反应,所以利
荧光显微镜技术可以区分活细胞与死细胞。“存活但无法培养(VBNC)”
的细胞在标准微生物培养基上无法生长,可用荧光显微技术进行观察。

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