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用于显微荧光测量的仪器为显微荧光分光光度计的应用




来源:yiyi
时间:2016-11-14 9:57:37

用于显微荧光测量的仪器为显微荧光分光光度计的应用

用于显微荧光测量的仪器为显微荧光分光光度计(microspectrofluorimeters)

该仪器主要
为用于荧光激发和发射光谱的定量而设计的?也可测量透射和反射
光谱。利用落射系统还可同时记录荧光发射和在激发波长的透射。
    显微荧光测量时,未知物荧光与标准物荧光相比较才能精确定
量。
    荧光标准物的必要条件是:①与被测量的荧光体相同,或至少
是具有相等或相似荧光激发和发射光谱的荧光体;②具有好的重复
性;③足够的稳定性。一个与蛋白结合的荧光色素的荧光特性与未
结合的荧光色素并不相同。
    所以,一个荧光色素的溶液可能不适合作为已结合荧光色素的
标准物。若无标准物,只能对不同实验组进行相对定量比较。
    显微荧光测量在荧光标记和免疫荧光标记中应用较多。神经组
织中的儿茶酚胺、神经通路的荧光标记、酶、肽、蛋白质的免疫细
胞化学等研究中均可采用显微荧光测量方法进行定量测定。近年来
应用较多的流式细胞光度计也常采用荧光标记测定方法。

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