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菌种斜面培养和平板培养技术-菌种鉴别技术




来源:yiyi
时间:2017-2-8 13:03:14

菌种斜面培养和平板培养技术-菌种鉴别技术
  

  1.斜面培养  将培养基注入试管中,灭菌后摆成斜面,可较长期
贮存备用。在出外采集虫尸样本时,可用小试管携带一些选择性培养基
,随时进行分离。接种时斜面试管上贴上标签,注明接种菌名称、日期
、接种人姓名等。斜面培养还是菌种保藏及运输邮寄的方便方法,它封
闭严密,易避免杂菌污染。

  2.平板培养  平板培养是将溶化冷却到45—50℃的琼脂培养基注
入灭菌的培养皿中,直径9—1cm的培养皿注入12—15mL。轻轻转动培
养皿,使之均匀分布,凝固后即成平板。接种好的平板,为防止水分蒸
发,要翻转倒置于恒温箱中培养,多数虫生真菌不要求高温,一般在25
=C左右为宜,培养5天以后再行观察。

  根据培养目的不同,接种方法也不同,为观察菌落形态或测定菌落
直径生长量应采取点植培养,通常自斜面上蘸取极少量孢子,点植于皿
的中心或成三角形的3点。为分离菌种则采用划线分离培养和稀释分离
培养。为计数活孢子数量,则采用稀释接种培养。

  稀释接种培养方法有两种,即基内接种和表面接种,基内接种是将
相应稀释倍数的菌液1mI,用灭菌吸管先置于灭菌皿中,再把溶化冷却
到50℃的琼脂培养基注入,迅速摇动混合均匀(顺时、逆时方向各10次)
,凝固后培养。表面接种是把0.1ml或0.2ml的相应菌悬液接种于平板
表面,再用玻璃刮铲涂布均匀,培养后计数。

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