菠菜叶绿体制备物-从含叶绿素样品观察显微镜
植物叶片线粒体
要从含叶绿素的膜上分离叶片线粒体实在是不太容易。单用差速
离心法获得的制备物中所含蛋白质与叶绿素的比例为15。这种制备
物可用相分配法加以纯化。得到蛋白质与叶绿素的比例为100。用
密度梯度离心也可达到同样的纯化程度，但线粒体制备物仍是绿色
。只有将三种方法：差速离心、密度梯度离心和相分配结合采用才
能得到不含叶绿素的制备物。
通过逆流分配可将由差迷离心分离的叶绿体分成三个群体组成
。左峰(1)代表由外膜和叶绿体基质包围着的完整叶绿体；中峰(Ⅱ
)代表裸露的类囊体膜(系统Ⅱ叶绿体)；而右峰(剪)代表重叠细胞
器复合物，它由一个到多个完整叶绿体组成，周围是包含有线粒体
和过氧化物小体的合膜细胞质层。菠菜叶绿体制备物中重叠细胞器
复合物的量为总叶绿素的0．5％到5％。子叶或幼嫩叶片的重叠细
胞器复合物得率较高，延长匀浆时间会增加其得率。令有重叠细胞
器复合物的膜似乎与细胞质膜是一样的，它们与原生质体或分离的
细胞质膜有十分相似的分配特点。
结合采用两种不同的分离方法，即离心和相分配是行之有效的
。峰I和峰Ⅲ的颗粒大小差不多一样，但因其表面性质不同，通过
分配法可达到有效的分离。该结果还表明，CCD在发现新类型细胞
颗粒方面也是很有用的。在早期，用电镜观察常规叶绿体制备物时
，由于峰Ⅲ中重叠细胞器复合物的浓度很低，而未被发现。但在用
ccD所得的峰Ⅲ中，它们被选择性地富集，几乎达到100％的群体。
由于叶绿体和其周围的细胞层合作，重叠细胞器能合成蔗糖和氨
基酸。常规叶绿体制备物中混有重叠细胞器复合物，导致在叶绿体
新陈代谢和酶的位置．
