激发滤片和滤片组合影响荧光图像的成像效果
观察和记录结果 荧光显微镜的原理。激发滤片和阻挡滤片的较佳组合对荧光图像的强度和对比度起到了很重要的作用。另外,正确选择合适的物镜也很关键。通常选用数值孔径(NA)较高的平面视野物镜, 细胞制备物 由于制备物中不同细胞之间GISH的效率有所不同。因此,必须通过选择正确的实验材料,和进行染色体预处理等方法来使有丝分裂指数达到较大。对于荧光检测而言,每个载玻片上细胞的绝对数目可能要比用于染色的少一些,这是因为在同一个显微镜视野中,荧光材料之间会相互干扰。较好做到,样品中没有细胞壁和细胞质,而且载玻片上没有灰尘或其他光散射碎屑。 植物材料 若有全植株,细胞核应当从分裂旺盛的分生组织中分离,这里累积的代谢物较少,例如离体培养物的根尖,或者是正在完全发育的幼嫩植株的根尖。可以从24h前浇水的盆栽植物上,或者从水培养的插条上取幼嫩的根尖。从植物组织中得到有丝分裂和减数分裂的实验方法将在下面介绍。也可以直接从原生质体中收集正在分裂的细胞核。
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