细胞悬浮培养培养基观察用微生物分析显微镜
组织和细胞培养法
组织和细胞培养法,可分为悬浮培养法、组织片固定培养法和单层
细胞培养法。
(1)悬浮培养法:是将组织片或者分散的细胞(用胰酶、乙二胺四乙
酸等使细胞分散成单个),以及细胞培养液,一起装入玻璃容器内,密封
后培养的一种方法。在观察病毒增殖时,是否要把组织培养液按种易感
动物?要取决于红细胞凝集价或补体结合抗原价的测定、培养基pH的变
化和组织片的病理组织学检查结果。这种方法已在分离病毒、组织亲
和性预备试验、大量生产疫苗和血清反应用抗原等方面应用。
(2)组织片固定培养法:把小组织片放在已涂上薄薄一层鸡血浆的玻
璃壁上,加入适量的鸡胚浸出液,轻轻摇动,使组织片与血浆凝固,此时
组织片固定在玻璃壁上。即使加入营养液,也不会使它们分离。如果将
它培养,则在组织片周围表示新生的细胞,因此可以接种病毒,观察细胞
病变。
(3)单层细胞培养法:用细胞分散剂(胰酶、乙二胺四乙酸和胶原酶
等),使织分散成单个细胞。再使细胞悬浮在营养液中,若静止培养数天
,则细胞下沉并跗着在玻璃壁上细胞在那里开始分裂增殖。一般,对于
正常细胞而言,增殖的新生细胞沿着玻璃面排列,由于不发生重迭分裂,
历以不久就形成单层细胞培养( monolayer cell culture)单层细胞培
养,在接种病毒后引起的变化容易看到,而且由于病毒和细胞的量的组
合也正确,所以能非常精确的作许多试验。感染病毒的细胞一旦进入培
养液,则新生的病毒就不断地释放到细胞外面,结果所有细胞都感染。
这时,如果让适当稀释过的病毒容液在单层细胞上面流过,待细胞吸着
病毒以后,再洗细胞,并加上一层含背养液的琼脂,那么在感染细胞中形
成的新病毒,因有琼脂所隔而不能扩散到远离的细胞,只使邻近部的细
跑感染,并形成肉眼可见的、散在性的、圆形的细胞病灶,即蚀斑( pla
que)。
