食品微生物学小型化检测分析光学显微镜
小型化检测仪器和检测工具的发展
在食品微生物学中,对正常菌群、腐败组织、食源性病原菌、发酵
剂等进行的微生物学检测鉴定是应用微生物学的重要组成部分。传统
检测方法有一百多年的历史,即采用大量培养基(10m或是更多)来研究
细菌的某一特性(例如,采用乳糖肉汤来培养大肠杆菌并进行乳糖发酵
实验)。将待测微生物接种到试管中很麻烦,因为一次只能接管。很多
微生物学家设计了合适的容器和更小的试管来进行这些实验,以减少培
养基的使用量。该作者系统地开发了许多适用于微孔板的简化方法来
减少试剂和培养基的使用量(从5~10mL减少到约0.2m),该微孔板有96个
孔,按8×12的格局排列。该系统的基本组件包括经过商业灭菌的微孔
板(用来盛放待测培养物)、批量接种设备、用来盛放固体培养基的容
器(大 Petri盘),以及液体培养基(盛放于另一种微孔板中,每孔可装0.
2mL液体培养基)。
把待测液体培养物(纯培养物)导入无菌微孔板的孔中以制成样板(
每孔0.2m)。微孔板最多可容纳96个不同的培养物,或48对相同培养物
或期望的多种组合。采用无菌多头接种器(从同一板上伸出的96个吸头
)将这些培养物转移到固体或液体培养基中。接种器采用酒精火焰灭菌
,每一次转移相当于传统方祛的96次独立接种。经合适的温度培养后,
固体或液体培养基中培养物的生长情况能被观察并记录下来,对所得数
据可以进行分析。这些方法适合于研究大量的独立菌落,或对待测样品
中大量微生物进行研究。该作者采用此小型化系统从肉类和其他食品
中鉴定出数以千计的细菌,研究了有机染料对酵母和细菌的影响,对多
种组分中的微生物进行了具有挑战性的研究并取得了很好的结果。这
些系统中的大多数最初用于肠道菌检测(如沙门菌属、志贺菌属、变形
杆菌属、肠杆菌属等)。后来,许多公司扩大了检测系统的检测范围,以
便鉴定非发酵菌、厌氧菌、革兰阳性菌,甚至酵母和霉菌。起初,需要
一名分析人员来读出每个小孔中反应的颜色,然后对照人为制定的编码
来识别微生物。
在许多实验室,自动稀释仪已广泛地应用于快速、准确的样品稀释,
液体转移到微孔板已实现自动化;②普遍使用的微管自动读数器能有效
地读出微管中液体的混浊度、颜色以及荧光性来计算MPN值;③一流的
数学模型,计算机解析和结果打印输
